超聲波細胞破碎儀是一(yi)種(zhong)先進的(de)(de)(de)實驗室設備,廣泛應用于生(sheng)(sheng)物、化(hua)學(xue)(xue)和醫學(xue)(xue)研(yan)究領域。它的(de)(de)(de)主要(yao)(yao)功(gong)能是通(tong)過高頻(pin)超聲(sheng)波的(de)(de)(de)作用,將細(xi)胞膜破(po)裂,從而釋放出細(xi)胞內(nei)的(de)(de)(de)蛋白質(zhi)、核(he)酸及其他重要(yao)(yao)的(de)(de)(de)生(sheng)(sheng)物分子(zi),這為(wei)后續(xu)的(de)(de)(de)生(sheng)(sheng)物分析提供了極大的(de)(de)(de)便利。超聲(sheng)波細(xi)胞破(po)碎的(de)(de)(de)過程通(tong)常是迅速而有效的(de)(de)(de),能夠保持樣本的(de)(de)(de)完整性,減少因過度破(po)碎而引起的(de)(de)(de)物質(zhi)降(jiang)解。
細胞超聲破(po)碎儀的使用方法(fa)
使(shi)用細胞超聲破(po)碎儀的步(bu)驟如(ru)下:
準備階段:
確(que)保超聲(sheng)(sheng)波細胞(bao)破碎儀完(wan)好無(wu)損(sun),并準備所(suo)需(xu)的超聲(sheng)(sheng)探頭、試管(guan)、研缽等樣品(pin)容器。
根據實(shi)驗設計準(zhun)備(bei)好所需的(de)緩沖液(ye)和其(qi)他輔助試劑。
連接儀器:
將(jiang)超聲波(bo)細胞(bao)破碎儀的(de)電(dian)源(yuan)線連接(jie)好,接(jie)通電(dian)源(yuan),按儀器開機(ji)鍵,電(dian)源(yuan)指示燈亮。
把(ba)與(yu)變幅(fu)桿(gan)相(xiang)連的(de)換能器(qi)放入隔(ge)音箱(xiang)頂部的(de)專用插孔內(nei),調節隔(ge)音箱(xiang)內(nei)的(de)升降臺以確定變幅(fu)桿(gan)在(zai)容器(qi)中的(de)高低(di)位置(zhi),使其在(zai)容器(qi)的(de)中心位置(zhi),變幅(fu)桿(gan)與(yu)容器(qi)壁(bi)不能相(xiang)接觸。
樣品處理:
選擇合適的樣品容器,并(bing)根據實驗需要調整樣品的數量和濃(nong)度(du)。
在(zai)樣品容器中添加適量的緩沖液或其他試劑(ji),以保持樣品在(zai)超聲處理(li)過程(cheng)中的穩(wen)定性和(he)活性。
設置參數:
根據細(xi)胞破碎(sui)量的多(duo)少、時間(jian)長短、功(gong)率(lv)大小,選擇合適規格的變幅桿(gan)型號。
設定儀器的輸(shu)出功(gong)率、工(gong)作間(jian)隙時(shi)間(jian)、工(gong)作次數。通常,超聲時(shi)間(jian)不宜過長,控制在1-5秒(miao)為宜,間(jian)隔時(shi)間(jian)在5秒(miao)以下。具體設置請參照儀器說明書。
超聲處理:
將(jiang)樣品容器放置在超聲(sheng)細(xi)胞破(po)碎機的樣品架中,并確(que)保樣品能夠充分暴露在超聲(sheng)波(bo)中。
將超聲探(tan)頭放入樣品容器中,確(que)保探(tan)頭與樣品充分接觸(chu)。
按(an)儀(yi)器的(de)復位按(an)鈕(niu),然后(hou)(hou)按(an)啟動(dong)/暫停鍵開始超聲粉(fen)碎(sui)。待(dai)設定的(de)間(jian)隙時(shi)間(jian)過后(hou)(hou),儀(yi)器即(ji)進入振蕩狀態,顯(xian)示屏會(hui)顯(xian)示工(gong)作(zuo)時(shi)間(jian)、間(jian)隙時(shi)間(jian)及(ji)工(gong)作(zuo)次數。
如需暫停,可再(zai)次按(an)啟動/暫停鍵(jian);如需重(zhong)復(fu)試驗,按(an)復(fu)位(wei)按(an)鈕并重(zhong)復(fu)上述工(gong)作。
后續處理:
完(wan)成(cheng)超聲(sheng)處理后,將樣品從超聲(sheng)細胞破碎機中取出,并進行必要的(de)離心或過濾等操(cao)作,以分離目(mu)標物(wu)質。
處理樣品中可能存在的(de)殘余細胞碎片或其他雜質(zhi),然后進(jin)行下一步的(de)實驗操作,如蛋白質(zhi)鑒定、核酸提取等。
清潔與維護:
使用完畢后,用酒精或清水清潔(jie)變幅桿(gan)探頭。
注意(yi)超(chao)聲波細胞(bao)破碎儀應安(an)放在(zai)干凈、干燥處(chu),避免潮濕、高溫(wen)、灰(hui)塵及有腐蝕性氣體(ti)的環境(jing)。
超聲破(po)(po)碎儀破(po)(po)碎細胞(bao)需(xu)要的時間
超聲(sheng)破(po)碎儀破(po)碎細胞的時間需求因不(bu)同類型的細胞而異:
真(zhen)菌和細菌:這些(xie)細胞由(you)于(yu)結構較為簡單,一般需要破碎(sui)15-60秒。
哺乳(ru)動物細(xi)胞(bao):這(zhe)類細(xi)胞(bao)的破碎時間一般在30秒至3分鐘之間,具體時間取決于細(xi)胞(bao)類型(xing)、細(xi)胞(bao)密(mi)度和超(chao)聲波的參數設(she)置。
植物細(xi)胞(bao):由于植物細(xi)胞(bao)的細(xi)胞(bao)壁比較堅硬,因此(ci)破碎時間一般比哺乳動物細(xi)胞(bao)長(chang),大(da)約需(xu)要5-10分(fen)鐘。
請注意(yi),上(shang)述時間僅供(gong)參考(kao),實際(ji)使用(yong)時可(ke)能需要根據(ju)實驗條(tiao)件和具體(ti)要求進行(xing)調整。此外,超聲波破碎器的功率也是影響細胞破碎效率的關(guan)鍵因(yin)素之一,具體(ti)設(she)置也需參照(zhao)儀器說(shuo)明書和實驗需求進行(xing)。
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